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- 干货 | 融解曲线全面解析看这里！ - 知乎
融解曲线的Tm值是融解曲线中的重要参数，在使用同一qPCR试剂下，目标基因融解曲线的Tm值是由其产物长度与GC含量决定的。 目标基因的qPCR产物长度越长、GC含量越高，Tm值越大。 不同的qPCR产物因其长度与GC含量不同，它们的Tm值大小也不一样。 如下图所示，基因1 qPCR产物长度较基因2 qPCR产物短，那融解曲线表现出基因1的Tm值低于基因2的Tm值。 同理，如果qPCR扩增体系不特异，出现一个非特异性扩增产物，那qPCR产物即由目的产物与非特异性产物共同构成，因两者长度与GC含量不同，在融解曲线上会表现出两个Tm值，即两个波峰；若非特异性产物Tm值与目的条带的Tm值接近，融解曲线可能出现宽峰。 例1：单峰-qPCR产物单一 例2：杂峰 宽峰-qPCR产物不单一
- 引物的Tm值是什么意思？为什么要维持在55-65℃？ - 小桔灯 . . .
摘要: 引物的Tm值是一个关键参数，它直接影响PCR反应的成功与否。 在聚合酶链式反应（PCR）中，引物的设计至关重要，而其中一个重要参数就是引物的熔解温度（Tm值）。 Tm值不仅影响着引物与模板DNA结合的有效性，还决定了整个PCR反应的特异性和效率。
- 解链温度_百度百科
它是DNA双链稳定性的关键指标。 在聚合酶链式反应（PCR）中，解链温度是设计引物和设定退火温度的重要参数。 其数值可通过公式计算，常用公式为Tm = 4℃ (G + C) + 2℃ (A + T)（适用于25个碱基以下的寡核苷酸），或与引物长度、GC含量及溶液离子浓度相关。
- 实验答疑室丨读懂qPCR熔解曲线“峰”言“峰”语
那么，这位“鉴官”是如何工作的呢？ qPCR熔解曲线是指在PCR扩增结束后，通过缓慢升温并实时监测荧光信号变化而绘制出的曲线。 其基本原理在于：不同序列的DNA片段因其GC含量、长度和特异性的不同，具有独一无二的熔解温度（Tm值）。
- 引物Tm值计算工具
使用本软件可以计算引物的最适PCR退火温度（Tm值）。 1、在文本框中输入需要进行Tm值计算的引物序列，左下方即会出现引物的相关信息。 2、点击清空按钮，继续下一条引物Tm值计算。 注： Tm值采用近邻热力学理论进行计算（Nearest Neighbor Thermodynamic Theory,NN）。
- qPCR中奇怪的融解曲线分析 - 知乎
升温前PCR产物成双链结构，具有较高的荧光强度信号，当逐渐升高温度的同时，DNA双链逐渐打开，双链中嵌入的染料减少，随之荧光信号也逐渐降低，当双链DNA解链一半时，荧光信号急剧下降，此时的温度即为融解温度（Tm）。
- PCR实验引物设计有什么要求？TM值一般多少最合适？
Tm值在72℃左右可使复性条件最佳，至少要在55-80℃之间。
- Tm 计算器 | Thermo Fisher Scientific - CN
To use the calculator select your DNA polymerase, type in or paste your primer sequences, and provide your final primer concentration T m values, annealing temperature, and other data are automatically generated
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