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- 什么是sgRNA？ - 知乎
sgRNA 是大名鼎鼎的基因编辑神器 Cas9 系统的“指挥中心”，可以引导 Cas9 对 DNA 进行定点编辑。经过无数大牛的积极探索，逐渐成熟的 Cas 9 基因编辑技术因其操作简单、编辑效率高等优势而席卷全球。因此，Cas9 基因编辑技术被称为诺贝尔奖级别的发明。
- 请问CRISPR Cas9的整体原理是什么？ - 知乎
通过创造性地连接tracrRNA-crRNA为嵌合RNA——sgRNA（single guide RNA），简化的操作过程：sgRNA的在PAM的参与、Cas9的介导下与双链DNA配对，Cas9的2个活性中心切割靶标DNA为DSB，引起NHEJ机制，产生突变。sgRNA的tracrRNA段越长，Cas9的切割效果越好。
- 基因编辑sgRNA设计就是目的基因要切除部分的PAM后面的片段吗 还是有其他部分 ? - 知乎
3 sgRNA骨架：除了特异性靶向序列之外，sgRNA还包含一个骨架结构，这有助于sgRNA的稳定性和与Cas9蛋白的结合。 4 特异性和副作用最小化： 设计sgRNA时，需要考虑其特异性，确保它只靶向想要编辑的基因区域，以减少非特异性编辑和潜在的副作用。
- 什么是sgRNA？ - 知乎
sgRNA 是大名鼎鼎的基因编辑神器 Cas9 系统的“指挥中心”，可以引导 Cas9 对 DNA 进行定点编辑。 经过无数大牛的积极探索，逐渐成熟的 Cas 9 基因编辑技术因其操作简单、编辑效率高等优势而席卷全球。
- 如何设计crisper-dcas9系统的gRNA，具体步骤是什么？ - 知乎
为了方便实验设计以及提高gRNA的稳定性，Jennifer Doudna和Emmanuelle Charpentier将crRNA和tracrRNA融合成一条RNA链条，并把其称为sgRNA (single-guide RNA)。 与 CRISPR-Cas9 系统不同的是 在CRISPR-Cas12a 系统中，Cas12a不需要tracrRNA，并且产生的断链为粘性切割，并识别富含T的PAM。
- 什么是向导RNA？ - 知乎
向导RNA（guide RNA，gRNA），也称为小向导RNA（small guide RNA，sgRNA）。是作用于动质体（kinetoplastid）体内一种称为RNA编辑（RNA editing）的后转录修饰过程中。也是一种小型非编码RNA。
- AAV-sgRNA病毒敲除肝内基因的具体用法有吗？ - 知乎
序列验证：验证所选sgRNA靶点周围没有多态性，并通过生物信息学工具检查其在基因组中的唯一性。 2 构建AAV载体 Cas9和sgRNA的表达：构建一个AAV载体，通常包括一个驱动Cas9蛋白表达的普遍启动子（如CMV或EF1a），以及另一个单独或同一载体上驱动sgRNA表达的U6
- 可以设计两个sgRNA用于敲出一个基因嘛？ - 知乎
基因编辑：将sgRNA与Cas9蛋白表达载体转化植物，实现目标基因的敲除或敲低。 获得MiMe突变株： 经过基因编辑后，获得基因敲除或敲低的MiMe突变株，这些突变株的生殖细胞在减数分裂时发生异常，转变为类似有丝分裂的分裂方式。
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